【摘要】目的：探討主動免疫療法對原因不明復發性流產(URSA)患者外周血CD56+CD16+NK細胞及CD4+CD25+Treg細胞表達的影響。方法：應用流式細胞儀檢測50例URSA患者經主動前后外周血CD56+CD16+NK細胞及CD4+CD25+Treg細胞，并與正常育齡婦女作對照。結果：與對照組比較，URSA組CD56+CD16+NK細胞比例上升而CD4+CD25+Treg的表達下降(P<0.05)。經淋巴細胞主動免疫療法的患者，治療后CD56+CD16+NK細胞數量較治療前降低(P<0.05);CD4+CD25+Treg的表達較治療前增高(P<0.05)，差異有統計學意義。結論：URSA的發生與CD4+CD25+Treg的表達下降及具有殺傷活性的CD56+CD16+NK細胞數量上升有關，主動免疫療法可以降低CD56+CD16+NK細胞數量，上調CD4+CD25+Treg的表達，從而有利于胚胎發育。

【關鍵詞】復發性流產 淋巴細胞免疫療法 自然殺傷細胞

資料與方法

2008年10月～2009年8月原因不明復發性流產(URSA)患者50例作為治療組，年齡22～44歲，平均29.67±4.1歲。正常對照組：同期正常非妊娠婦女27例，年齡23～39歲，平均28.91±2.02歲。

方法：主動免疫療法方法。抽取健康配偶或第三者外周血50ml，分離淋巴細胞，用生理鹽水充分洗滌3次，調至細胞濃度(2～7)×107/ml,分別在患者前臂注射3～5mm的皮丘各3個。每4周1次，3次為1個療程。

統計學處理：組間的比較用q檢驗。

結果

URSA組治療前CD56+CD16+NK細胞表達為(22.68±6.21)%，較正常對照組(13.24±3.51)%高，差異有統計學意義(q=2.96，P<0.05)。URSA組治療后CD56+CD16+NK細胞表達為(15.07±4.54)%，較治療前下降，差異有統計學意義(q=3.45，P<0.05);治療后CD4+CD25+Treg細胞表達為(11.40±5.57)%，較治療前上升，差異有統計學意義(q=2.77，P<0.01)。

討論

復發性流產是指連續≥2次自然流產，發生率1%～5%[1]。除已知的遺傳、解剖、感染、內分泌等原因外，仍有50%～70%原因不明，稱為原因不明復發性流產(URSA)，其中50%～60%與免疫有關^②。多項研究表明，復發性流產患者由于NK細胞毒性明顯增高，而調節T細胞(CD4+CD25+Treg)表達下降，導致對胚胎的免疫殺傷，從而引起流產。

NK細胞為非特異性免疫活性細胞，其細胞表面標志為CD56分子。NK細胞的殺傷活性無MHC限制，通過其直接與靶細胞接觸后釋放穿孔素、顆粒酶等細胞因子，誘導靶細胞程序性死亡。NK細胞分兩類，一類為CD56+CD16-(90%)另一類為CD56+CD16+(10%)。CD56+CD16-NK細胞有免疫抑制作用和免疫營養作用。可經IL-2刺激轉化為CD56+CD16+NK細胞，細胞毒性增強，發揮免疫防御功能^③。研究證實CD4+CD25+T細胞在妊娠期參與抑制母體對同種異體移植物胎兒的免疫反應，從而保證妊娠的成功。

本研究表明：復發性流產患者接受主動免疫療法后CD4+CD25+Treg的比例明顯上調，CD56+CD16+NK細胞的表達下降。由此推測應用淋巴細胞主動免疫療法復發性流產的患者可能是通過外來抗原激活母體調節性T細胞，以及通過NK細胞功能狀態調節的來誘導母體對胚胎的免疫耐受，保護胚胎免受母體的排斥，從而妊娠得以成功。而且檢測CD4+CD25+Treg細胞、CD56+CD16+NK細胞可作為免疫療法療效觀察的有效指標。

【參考文獻】

1、StephensonMD.Frequencyoffactorsassociatedwithhabitualabortionin197couples.FertilSteril,1996,66:24-29.

2、林其德.免疫所致復發性流產和習慣性流產.中華婦產科雜志,2000,35(12):760.

3、MatsubayashiH,ShidaM,KondoA,etal.Preconceptionperipheralnaturalkillercellactivityasapredictorofpregnancyoutcomeinpatientswithunexplainedinfertility.AmJReprodImmunol,2005,53(3):126-131.