血漿一氧化氮水平與牙周炎相關性的研究
【摘要】 目的 研究慢性牙周炎和牙周健康者血漿一氧化氮(NO)的水平差異,以及NO水平與牙周炎癥的相關性。方法 選擇慢性牙周炎患者22人作為實驗組,牙周健康者40人作為對照組。分別采集清晨空腹靜脈血，分離血漿樣本,采用硝酸還原酶法測定其中NO水平。結果 牙周健康者和慢性牙周炎患者血漿NO含量分別為(86.65±40.45)μmol/L和(145±48.9)μmol/L,二者差異具有統計學意義(P<0.01),慢性牙周炎患者血漿NO水平明顯升高，經基礎治療后NO含量顯著下降。血漿NO水平與牙周炎癥程度具有正相關關系(P<0.01)。結論 慢性牙周炎患者血漿NO水平顯著高于牙周健康者,并與牙周炎嚴重程度相關。
【關鍵詞】 血漿一氧化氮 牙周炎 相關性
一氧化氮(NO)是一個具有多功能的重要細胞內信使①,血管內皮細胞是體內合成NO最主要的細胞。NO是一重要的血管活性因子, 使血管舒張并維持血管張力。對于NO在牙周病發病過程中的研究，學者們進行了一些相關的研究。
1 材料與方法
1.1 研究對象 為2007年6月—2008年3月來我院體檢和門診就診者。正常對照40例,為健康者,均無牙周、粘膜等方面的疾病,男23例,女17例,年齡25～53歲。慢性牙周炎患者22例,男14例,女8例,年齡19～56歲。所有研究對象均知情同意并符合:①全身健康、無系統性疾病;②3個月內未服用抗生素及非甾體類抗炎藥物;③6個月內未行牙周治療;④女性未妊娠;⑤無吸煙嗜好。正常對照組與牙周炎組的年齡均無顯著性差異( P>0.05)。
1.2 標本的采集及處理 實驗組與對照組均于清晨空腹采肘靜脈血2ml,置于含10%EDTA二鈉30μl 和抑肽酶40μl的試管中, 混勻,離心(4℃, 3000rpm,10min),分離血漿,放20℃冰箱保存。測定前使樣本置于室溫中復融, 再次4℃,3000rpm離心5min, 取上清液測定。實驗組經嚴格的基礎治療，包括齦上潔治術和齦下刮治及根面平整術，治療后再次按上述方法測定血漿NO水平。
1.3 測定方法 按NO試劑盒(南京建成生物工程研究所)說明，用硝酸還原酶法檢測血漿樣本中NO水平,每樣本均設復管,空白對照為100μL雙蒸水。各樣本分別于721型分光光度計、550nm波長、0.5cm光徑比色測定光密度,根據試劑盒提供公式計算血漿樣本中NO濃度,單位為μmol/L。
1.4 統計學處理 實驗數據以SPSS11.5統計軟件進行分析，實驗組與對照組比較采用單因素方差分析，治療前后比較采用重復測量數據的方差分析，P<0.05為有統計學意義。
2 結果
2.1 實驗組與對照組血漿NO水平的比較 我們經實驗測定血漿NO水平在牙周炎時顯著高于正常人, 慢性牙周炎患者血漿NO的含量與牙周健康者血漿NO的含量相比較,差異具有統計學意義(P<0.01),慢性牙周炎患者血漿NO的含量顯著升高。慢性牙周炎患者與牙周健康者血漿NO水平比較
2.2 實驗組牙周基礎治療前后血漿NO水平的比較 22例慢性牙周炎患者經嚴格的牙周基礎治療，治療后血漿NO水平明顯下降。血漿NO水平與治療前相比較，差異具有統計學意義(P<0.01)。 實驗組基礎治療前后血漿NO水平比較。
3 討論
體內的NO是由L精氨酸(LArg) 在一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS) 的催化下生成L瓜氨酸時釋放的。由于NO是一種含不成對電子的氣體, 具有自由基結構, 生物半衰期極短僅3～5秒, 很快會被氧化為NO2- 和NO3- , 所以檢測組織或體液內的NO含量, 可以通過測定NO的代謝終末產物NO2-和NO3-含量間接得知。
有報道已經證實NO對維持口腔內正常菌群的平衡以及抗微生物感染有直接的影響。同時,適量的NO對牙周組織的健康及功能的正常發揮起著重要的作用。對NO與牙周病的關系,不同學者采用了不同的方法進行研究。張昕、陳世璋等應用免疫組化定量分析發現牙周病患者牙齦組織中NOS含量比正常牙齦組織中高②。陳桂珍等通過檢測牙周炎患者唾液NO的含量,發現牙齦炎和牙周炎患者唾液NO的含量顯著高于健康人,且牙周炎患者明顯高于牙齦炎患者③。龔斌、徐立平等研究發現正常狀況下與牙齦炎癥狀態下牙齦組織內NO含量有顯著性差異,牙齦組織NO含量則與牙齦指數呈顯著負相關④.已有研究發現牙周治療前后⑤⑥，收集慢性牙周炎患者的牙齦組織，觀察誘導型一氧化氮合酶的表達，牙周治療前有大量炎癥細胞浸潤的標本中，誘導型一氧化氮合酶的表達明顯增加，而治療后則下降。
NO是由內皮細胞及某些神經細胞釋放的體內主要的舒張血管物質。內源性NO可直接導致血管擴張并可調節血流和血壓,還可抑制血小板在內皮細胞表面黏附及血小板聚集作用。在牙周炎癥狀態下，血漿ET的含量顯著增高，而NO的水平也相應增高，來對抗ET所造成的牙周組織小血管及微血管的強烈收縮，屬于一種防御反應。在這個防御反應的過程中，過量產生的NO會引起牙周組織破壞，并參與牙周病的發病，間接地造成了牙周組織的損傷，具體的損傷機制尚需進一步研究。
我們通過檢測血漿NO水平來觀察血漿NO水平與牙周炎的關系，這種方法采集標本簡單，檢測結果準確可靠。我們的結果顯示慢性牙周炎患者血漿NO水平顯著高于牙周健康者;慢性牙周炎患者經嚴格的牙周基礎治療后，血漿NO水平明顯下降，其差別具有統計學意義。我們的結論也證實了慢性牙周炎患者其血漿NO水平顯著高于牙周健康者，與先前的研究牙齦組織及唾液的NO含量變化相一致。
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